菊苣组培及无性系建立的研究二

  结果与分析 
    1.愈伤组织的诱导
    在不用激素或BA与IAA配合使用条件下。不能诱导叶柄块形成愈伤组织；而浓度分别为0.4mg／L、0.8mg／L、1.2mg／L、1.6mg／L、2.0mg/L的BA与浓度为0.5mg／L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L和2.5mg／L的NAA、2,4一D丁酯配合使用时。几乎所有的叶柄块都能够诱导形成愈伤组织，但诱导的愈伤组织生长速度及外部形态却差异较大。在BA浓度为0.4mg/L、2.4一D丁酯浓度为1.6mg／L的培养基上。不仅愈伤组织的诱导率为98%。愈伤组织的生长速度快，而且所诱导的愈伤组织外观呈淡绿色的颗粒状，愈伤组织颗粒问连接松散、质地疏松。一般认为，这种愈伤组织为具有分化能力的愈伤组织。除MS+BA0.4mg／L+2，4-D丁酯1.6mg/L这一培养基外，在其它培养基上诱导的愈伤组织从形态、结构、颜色和质地等性状上看。均为没有分化能力的愈伤组织或分化能力差的愈伤组织。把在MS+BA0.4mg／L+2,4-D丁酯1.6mg/L培养基上诱导的浅绿色颗粒状愈伤组织。在同一培养基上连续继代培养9代。形成的愈伤组织仍为具有分化能力的愈伤组织。这说明MS+BA0.4mg／L+2,4一D丁酯1.6mg/L是诱导菊苣叶柄形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基。

    2.愈伤组织与不定芽的分化培养
    培养结果表明：培养10d左右，有的愈伤组织颗粒形成了绿色的芽点：培养到40d时进行统计。结果如表1所示。由表l可见。只有部分培养基能诱导颗粒状愈伤组织分化。其中在1／2Ms+AgN0320.5mg／L+BA0.3mg／L+NAA0.1mg／L培养基上不仅分化率达98.0%。而且分化的不定芽为高lcm左右、长势较旺盛的丛生状。把分化形成的丛生芽从基部切下，接种到相同堵养基上进行分化不定芽分化继代培养。45d后1个不定芽又会分化形成一丛生长较为旺盛的丛生不定芽。40d时平均分化增殖率为7.2倍。经过连续11次的继代培养，其分化率和长势基本保持不变。由此说明。该研究中菊苣叶柄愈伤组织和不定芽分化的理想培养基为1/2Ms+AgN0320.5mg／L+BA0.3mg／L+NAA0.1mg／L。 
    3.生根培养
    由表2可见。在附加NAA和IBA的生根培养基中，难以诱导生根；在IAA浓度达到和超过0.8mg/L时。也难以诱导生根；而在IAA浓度为0.2~0.4mg／L的生根培养基上。不仅生根率达90%以上。而且单株生根数也达到5.2条以上：并且l／3MS培养基上的生根效果好于1／2MS。观察还表明，在上述1／3MS生根培养基上，不仅生根率高、根数多，而且试管苗长势旺盛，培养至30d时，可以长成株高为3cm左右、具有6条以上根的试管苗。表明。1／3MS+IAA0.2~0.4mg／L是变异菊苣不定芽生根的理想培养基。 
   4.移栽
    由表3可见.以炉灰渣和河沙为移栽基质成活率较高，且长势较好。观察还表明。以炉灰渣为移栽基质时。不仅成活率最高，而且成活苗长势也最好。这说明炉灰渣是菊苣试管苗移栽的理想基质；把在温室中移栽成活试管苗移植到田间。通过3次小批量试验证明。具有优良变异性状的菊苣试管苗长势旺盛而整齐，优良的变异性状保持不变。单位面积可食嫩叶产量比实生苗提高13%~18%。 
    讨论
    迄今为止，虽然已有菊科莴苣属菊苣组织培养的报道。但未见栽培菊苣变异植株组织培养及无性系建立的报道。本研究利用变异菊苣的叶柄为外植体进行了愈伤组织诱导与分化、不定芽分化与生根、试管苗移栽与移植的研究。叶柄愈伤组织能以较高分化率分化出不定芽。证明菊苣的叶柄在离体条件下仍具有较强的生长分化力。这不仅证明栽培菊苣非分生组织细胞也具有全能性。而且还说明，通过组织培养的方法。能使大批栽培中偶尔发生的有利变异植株得到保存。为优良变异品系保存和利用提供了可能。
    对芽进行分化培养，40d时的分化率为7.2，按照这个增殖速度。年增殖率为7.29。这说明，通过这种方法进行快速养殖。一年内可增殖出大量的具有有利变异性状菊苣试管苗。这为优良植株的工厂化育苗，满足生产上对优良菊苣种苗的需求提供了可能。
    在生根培养时，使用IAA效果较好。这是因为IAA为植物天然生长素在光照条件下分解。把待生根的不定苗接种到以IAA为生长素的生根培养基中，7d左右诱导形成根原基，此时IAA因光照大部分分解.使其含量降低到不至于抑制根的伸长生长的浓度。
    在移栽过程中，炉灰渣为理想的移栽基质，这是因为炉灰渣为黑色物质。具有很好吸光作用，有利于增温，为幼苗生长提供较高温度，并且炉灰渣是经高温炼烧后所得。所带杂菌少，加之其来源较广，四季皆可获得。因此，炉灰渣是变异菊苣试管苗移栽的理想基质。