抑菌剂在开放组培中的使用及效果研究二

  结果
    2.1革兰氏染色法初步鉴定细菌
    结果表明：红色菌落的菌株为微球菌，乳白色菌落的菌株为葡萄球菌，均为革兰氏阳性菌。
    2.2抑菌剂对抑菌强度的影响    6种抑菌剂中，多菌灵除了不能有效抑制葡萄球菌和杜氏青霉外，对其他菌种抑制效果比较明显；Yl一1和代森猛锌对供试的6种菌抑菌作用具广谱性，但不能较好地抑制杜氏青霉，仅能在其生长初期18h内有抑制作用，24h后抑菌圈逐渐被蔓延的菌丝覆盖；冠菌清和扑海因对上述6种病原菌无抑菌作用，百菌清仅对黑曲霉有微小抑制作用（见图1)．因而，本实验筛选多菌灵、Yl一1和代森猛锌对微球菌、葡萄球菌、棕曲霉、黑青霉作进一步实验。

    2.3最低抑菌浓度测定 
    由表2可以看出，多菌灵对微球菌最低抑菌浓度是15.625mg/L；Yl一1对微球菌、葡萄球菌最低抑菌浓度均是62.5mg/L；代森猛锌对微球菌、葡萄球菌最低抑菌浓度分别是250、62.5mg/L
    2.4抑菌剂对霉菌菌丝生长的影响 
    多菌灵对棕曲霉、黑青霉菌丝生长抑制作用最强，不同浓度的多菌灵在10d内观察，菌丝生长相对抑制率均为100%；Yl一1对菌丝生长的抑制作用次之，其对棕曲霉菌丝生长的最低抑菌浓度为15.625mg/L，对黑青霉菌丝生长最低抑菌浓度为7.8125mg/L，第10天的抑制率分别为100%和97.4%；而代森猛锌相比之下抑制作用最弱，其对棕曲霉和黑青霉菌丝生长最低抑菌浓度均为125mg/L，第2天的抑制率分别为95.5%和100%.
    2.5抑菌剂对孢子萌发的影响
    根据表1、2及图1的结果，选择抑菌作用具广谱性的Yl一1作以下实验。
    结果表明：Yl一1对棕曲霉、黑青霉孢子萌发具有明显的抑制作用。0.9765625mg/L创的Yl一1对棕曲霉孢子萌发抑制率仍可达60.0%，对黑青霉泡子萌发抑制率可高达80.8%，并可使黑青霉孢子形态大小不一，而大于0.9765625mg/L的Yl一1可完全抑制棕曲霉和黑青霉孢子的萌发。
    2.6Yl一1对植物生长的影响和开放组培初探（见表3)
    根据表2，选择浓度为1000,250，62.5mg/L分别代表高、中、低3种浓度．实验结果表明：高浓度和中浓度的Yl一1对马铃薯试管苗生根、发育有明显的抑制作用，而低浓度的YI一1不仅能有效抑制试管苗的污染情况，而且对试管苗的生长发育无抑制作用（见图3)．在开放组培初探实验中，对照污染率为33.3%，高、中、低3种浓度污染率均为零。
    3、讨论
    上述6种病原菌进行体外抑菌实验结果表明，多菌灵不能有效抑制微球菌和杜氏青霉，代森猛锌虽对黑曲霉有较强的抑制作用，但对棕曲霉和黑青霉菌丝生长抑制作用较弱，而Yl一1对以上菌种都有不同程度的抑制作用，抑菌作用具广谱性。Yl一1对微球菌、葡萄球菌的最低抑菌浓度均为62.5mg/L；对棕曲霉菌丝生长最低抑菌浓度为15.625mg/L，对黑青霉菌丝生长最低抑菌浓度为7.8125mg/L；对棕曲霉、黑青霉孢子萌发最低抑菌浓度均为3.90625mg/L。在对植物生长影响试验中，62.5mg/L的YI一1对马铃薯试管苗生根、分化及生长无抑制作用，且在开放组培中未发生污染。因而，从抑菌作用的广谱性、显著性及对植物生长无抑制作用这3个角度出发，本试验研究表明，Yl一1可用作植物组织培养中的抑菌剂。
    在开放组培初探中，Yl一1在2Od中能有效抑制试管苗的污染，使开放组培的实现成为可能。关于Yl一1的抑菌机理还有待于进一步研究。