菊苣组培及无性系建立的研究一

  菊苣又称法国苦苣、吉康利、苦白菜等，属于菊科莴苣属多年生草本植物，菊苣的嫩叶可以炒食、做汤或做色拉：软化栽培后的菊苣芽球可用以生吃。或做成鲜美开胃的凉拌菜：欧美等国还有人把菊苣的肉质根加工成咖啡的代用品或添加剂。由于菊苣中含马栗树皮素、马栗树皮甙、野莴苣甙、山莴苣素和山莴苣苦素等苦味物质，作为蔬菜食用具有促进胆汁分泌、改善睡眠、调节新陈代谢等功效，使其成为很受人们欢迎的新兴蔬菜。由于受到环境的影响，过去在北方难以进行栽培，但因近年来市场对菊苣的需求量很大，辽宁南部地区的农民开始进行栽培，在对菊苣的栽培品种——中囤一号进行栽种中，偶尔可以发现生长非常旺盛、可食嫩叶产量高、适合在辽宁南部地区栽培的优良变异植株，用这种变异植株的种子进行养殖，后代由于性状分离等原因，有利性状无法保持。为此，2004年当人们在种植中再次发现这种优良变异植株时，我们采用组织培养的方法对菊苣的优良变异植株进行了组织培养及无性系建立的研究，现报道如下：

    材料和方法 
    1.材料及灭菌
    将田间生长旺盛、具有有利变异性状的菊苣采回来后，切去叶片.将叶柄放到磨口瓶中，用自来水冲洗4次后，用0.05%安利洗涤液洗涤30min，洗至无泡沫时置于超净工作台上，用75%乙醇灭菌20s后迅速用无菌水洗涤3次，接着用0.1%HgCl2溶液振荡灭菌1min，再用0.05%HgCl2溶液振荡灭菌12min，接着用无菌水振荡洗涤6次。即获得无菌材料。 
    2.培养条件
    培养基以MS、1／2MS和1／3MS为基本培养基.附加不同浓度的细胞分裂素BA和生长素IAA、NAA、2，4一D丁酯。以MS为基本培养基时，加蔗糖30g／L：以1/2MS为基本培养基时，加蔗糖15g／L；以1／3MS为基本培养基时，加蔗糖10g／L。培养基胨力强度为180g／cm2，pH值5.8~6.0。培养温度18~26℃，光照10~12h/d.光照强度2000~3000lx。 
    3.试验方法 
    3.1愈伤组织诱导培养将无菌叶柄切成0.2cm左右的块，接种到以MS为基本培养基，附加不同浓度的BA、NAA、IAA和2，4一D丁酯的培养基上.进行愈伤组织的诱导，60d后观察统计。
    1.3.2愈伤组织及不定芽的分化培养将在诱导菊苣叶柄形成愈伤组织的理想培养基上诱导出的叶柄颗粒状愈伤组织接种到附加不同浓度BA、NAA的l/2MS+AgN0320.5mg／L和l/3MS+AgN0320.5mg/L培养基上，进行愈伤组织的分化培养。 
    3_3不定芽生根培养将上述分化培养的不定芽从基部剪下.接种到以1／2MS和1／3MS为基本培养基.附加不同浓度IAA、NAA和IBA的生根培养基上进行生根培养。培养到10d时有的培养基上可见形成根原基.培养30d时观察统计。 
    3.4试管苗移栽将生根苗培养瓶瓶塞打开，置于光照约5000Lx、温度20℃左右的条件下炼苗4d后，用镊子取出，洗去基部培养基，移栽到上面铺着5～6cm厚不同基质的温室苗床上，20d后观察统计。