2菌种分离和培养

母料培养配方：土豆200g,糖20g,琼脂25g,硫酸镁1．5g,磷酸二氢钾3g,味精1．5g, VB4片、水1000ml。

2．1 分离 取菌蕾大、色自、未开片或刚开片的子实体，放入无菌箱中，将预先浸于75％乙醇中的药棉挤

干后，在菌蕾表面擦拭灭菌，然后用锋利的解剖刀割取 l块心部组织，置 PDA培养基上，于25—28℃培养，随时拣出杂菌。灵芝菌丝幼时白色，长满斜面后就杂些黄色，菌丝紧贴培养基表面，菌丝长满斜面后，在

新的 PDA培养基上还可以继续分离扩大。

2．2 原种培养 培养基配方：①木屑78％，麦麸或米糠20％，蔗糖1％，石膏粉1％。②棉子壳90％，麸皮

8％，麸皮7％，石膏2％，磷肥1％。③棉子壳60％，木屑30％，麸皮7％，石膏2％，磷肥1％。料配好后，拌

匀，装于蘑菇瓶中，用扇形铁勺压紧，表面压平，洗净瓶壁，塞好棉塞，经1．5kg每平方米蒸汽压力灭菌1小时，常压8小时，闷24小时。冷却后用试管菌种接于此瓶中，每支母种接4—5瓶，25—28℃培养，菌丝长到瓶

底后即成原种。原种进一步扩大培养即为培养种。