花卉组织培养法

花卉组织培养法

    组织培养法是在人工控制的环境和无菌条件下，把植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，放到适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织会产生细胞分裂，形成新的组织。这种新的组织在适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，会产生分化，生长出各种植物的器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。

    这种培养方法可以有效脱除病毒，获得无病毒种苗，保证花卉质量而其他无论是嫁接、扦插或种子播种都可能会使植株感染上病毒，营养花卉质量，降低观赏性。

    并且这种培养方法，在一年内可以使一个分生组织产生几千甚至数万株优质组培苗，迅速推广，并且还节约了大量的人力、土地，管理还方便。

    这种方法还解决了一些植物产种子少或无法产种的难题，能够保持原母本的一切遗传特征，有利于植株的各种良好特征。

    1．组织培养分类

    根据培养的植物组织不同，可以把组织培养分为以下几类：

    （1）胚胎培养。把从植物胚珠中分离出来的成熟或未成熟的胚作为外植体的离体进行无菌培养。

    （2）器官培养。以植物的根、茎、叶、花、果等器官作为外植体的离体进行无菌培养。如把根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等进行离体无菌培养。

    （3）组织培养。以分离出植物各部位的组织，如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等作为外植体进行离体无菌培养。

    （4）细胞培养。以单个游离细胞，如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞，卵细胞作为接种体的离体无菌培养。

    （5）原生质体培养。以去除了细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。

    2．培养材料

    选择培养材料要根据培养目的进行适当选择，选择基本要求是容易诱导、带菌少。

    要选取植物组织内部无菌材料。为此要从健壮的花卉植株上选取材料，不要选取带伤口或有病虫害的材料。另一方面要在晴天，最好是中午或下午选取材料，一定不要在雨天、阴天或露水还没有干的时候选取材料。健康的植株或晴天光合呼吸旺盛的组织，自身消毒作用强，这种组织才会无菌。

    从外界或室内选取的植物材料，或多或少地会带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基，就会对培养基造成污染。所以，植物材料一定要经过严格表面灭菌处理，再经过无菌操作手续接到培养基上。

    3．培养基配制需要设备

    （1）准备室。准备室是用来完成洗涤器皿、培养基配制、分装、包扎、高压灭菌等环节的地方。准备室需要明亮、通风。室中的主要设备有电冰箱、高压灭菌锅、电炉、电子天平、酸度计等。

    （2）无菌操作室。无菌室要地面清洁、干燥，有紫外灯随时给室内杀菌。室内需要一台超净台。

    （3）培养室。培养室常年温度在25℃左右，房内要能保温隔热，并且具有很好的防寒性，能够做到冬暖夏凉。室内空气干燥清洁，定期进行消毒。室内需要有培养架和灯光、空调机、温度湿度计和温度自动记录仪。

    4．培养基配制和杀菌

    培养基的配制对培养成功与否起着非常重要的作用。目前MS培养基的应用最为广泛。

    为了简单方便，人们通常配一些浓溶液，等到用时稀释一下，成为培养基使用。这些浓溶液就是储备溶液，又称为母液。待到使用的时候，可以取一定母液稀释，再加上蔗糖、琼脂，配置到一定酸碱度的培养基。家庭需要培养基的时候，可以去直接购买已经配好的培养基母液。

    把配制好的培养基倒入广口瓶中，放入高压锅中进行消毒灭菌。

    5．外植体的建立和繁殖

    选取的植物的茎尖、叶等部位作为外植体，然后进行消毒处理，杀灭外植体的病菌。待接种后外植体长出新梢后，为了扩大繁殖，还可以把植物材料分切成数段进行增殖。

    经过扩大繁殖的植物一般没有根系，需要把其转移到生根培养基中进行培养，一个月后便可长出根系。

    长出的植物在进行移植前，要先打开培养容器的盖子，让其在自然光照下放三天，然后把植物的根系用琼脂冲洗干净，移植到经过高压灭菌的基质中，尽心养护。