2022-04-19
芦荟组培生产中几个关键技术
芦荟的组织培养是推动芦荟产业化种植的重要方面之一,在芦荟组织培养中,使用的生长素类有吲哚丁酸和萘乙酸,细胞分裂素类使用较多的是6-苄氨基嘌呤,zt和kt使用较少。不同品种的芦荟、不同部位外植体,对生长素的种类和浓度要求也不同。因此,生长调节物质的使用情况较为复杂,但大致遵循以下规律:
生长素类物质与细胞分裂素类物质搭配使用对芽的分化和增殖效果较好,而生根培养多数单独使用iba或naa。在促进侧芽产生时往往使用较高浓度的细胞分裂素,在一定浓度范围内,如使用高浓度6-ba可明显促进侧芽产生,随着6-ba浓度的升高,分化的芽也随之增加。但是,6-ba在培养过程中存在一定程度的累积效应,过高浓度的细胞分裂素会抑制新芽的发生和生长,且导致培养材料变异的概率增大。适宜浓度的iba比naa更有利于芽的分化和增殖,有实验表明,在相同的6-ba浓度下,iba作用比naa更有效,增殖率较高,苗生长粗壮,黄叶、畸形叶很少出现,若培养基中不加iba或其浓度过低,则芽变纤细,不利移栽成活;但高浓度iba明显抑制了芽的分化。而在生根培养基中,iba的生根效果通常要优于naa。
研究表明,活性炭对多数芦荟种类组培有促进生根作用,在加有活性炭的培养基中,活性炭可以吸收根基有害物质,促进生根作用。但活性炭的浓度不宜太高,过高则会吸附外源生长素,进而抑制生根作用。通常情况下,1mg活性炭大约能吸附100μg生长调节物质,在不同的培养基中,活性炭的吸附能力也有所不同。此外,向培养基中添加一定浓度的腐殖酸、香蕉汁和苹果汁等,可使腋芽提早萌动,提高腋芽的出芽率和增殖系数,促进组培苗的根系发育和叶片生长。
在芦荟的组织培养中,培养条件不同也会产生很大的影响。在培养条件中,以ph最为重要。培养基的ph一方面对离体器官的形成和发育起着重要的作用,另一方面对芽的生长、分化以及培养基的硬度有很大的影响。在偏酸性条件下比较有利于分化形成愈伤组织,并进一步形成不定芽;在中性至偏酸环境下,比较有利于不定芽的分化增殖。培养条件中,另一个重要的因素是光照,包括光照强度和光照时间。光照对外植体的褐变有一定影响。芦荟的组织培养一般在黑暗或弱光照的条件下进行即可,光照过强,外植体容易发生褐变。
另外,温度也是影响芦荟组织培养的一个重要因素,芦荟的组织培养通常在25℃条件下进行,温度过高或过低均易导致褐变的发生。通常在组织培养过程中加入抑制剂和吸附剂来减轻或避免褐变的产生。常用抑制剂有vc、半胱氨酸、硝酸银等,其中硝酸银的抗褐变效果较好,当硝酸银浓度为15mg/l时,抗褐变效果最佳。此外,向培养基中加入活性炭,也可有效降低外植体的褐变。
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