竹节秋海棠组织培养及快速繁殖方法

竹节秋海棠组织培养及快速繁殖方法

竹节秋海棠是秋海棠科秋海棠属的一种多年生常绿草本花卉，其花朵繁多，花色娇艳，花期特长（4——6个月），又较耐阴，适于栽培观赏，深受养花人的喜爱。但竹节秋海棠分株能力弱，茎段扦插成活率低，繁殖速度慢，性状易变异，无法满足市场需要。本文探讨的叶、叶柄、茎段为外植体的组培快繁技术，操作不受季节限制。通过组织培养，直接培育成再生植株，繁殖速度快，繁殖系数高，遗传性状稳定。并在壮苗生根阶段首次尝试用液培，效果甚是理想。液培苗粗壮，根系发达，移栽更易成活。出瓶、生根不易伤根，免受污染，洗苗、洗瓶也都更省工。我室出瓶移栽的竹节海棠苗，经半年种植，已正常开花。这为竹节秋海棠的快速繁殖提供了一条可靠而有效的途径，同时对其他植物的快速繁殖也可能有一定参考价值。现将竹节秋海棠组培快繁技术介绍如下：

 一、植物名称

 竹节秋海棠（b.president－carnot）

 二、材料类别

 叶片、叶柄、茎段

 三、培养条件

 以ms为基本培养基。诱导愈伤组织培养基：（1）ms＋ba3——5mg／l（单位下同）＋naa0.1——0．5。丛生芽增殖培养基。（2）ms＋ba1．0＋naa0.1。（3）ms十ba0.5十naa0.1。（4）壮苗培养基：1／2ms（液体）。（5）诱导生根培养基：1／2ms

 ＋naa0.2。上述培养基均加3．0%蔗糖、0.8%琼脂，ph值5．8。培养温度（24±2）℃，光照不宜过强，有80olx左右即可，光照10h／d。

 四、生长与分化情况

 （一）无菌材料获得

 将竹节秋海棠已平展之幼嫩叶片、叶柄、茎段先用适量洗衣粉对水洗涤，然后用自来水反复冲洗，于无菌条件下用75％酒精药棉擦拭干净，放于饱和漂白粉溶液10分钟，后置于0．1%升汞溶液中消毒2分钟，用无菌水冲洗5——6次，消毒滤纸吸收干表面水分，叶片切成0．5cm见方小块，叶柄、茎段则切成约长1cm左右长条，均接种于培养基（1）上。

 （二）丛芽的诱导与增殖

 接种、培养1周后，叶、叶柄、茎段周围开始膨大、增厚，质地变硬，逐渐形式黄绿色愈伤组织，3周后渐渐分化出小芽点，芽点继续生长，约5周左右形成明显的丛生芽。将丛生芽切成小块，接种于（2）和（3）培养基上进行增殖，小芽丛上不断分化出很多幼芽。叶、叶柄、茎段在两个培养基上增殖速率基本相同，约4周左右继代1次，增殖系数可达6——9。

 （三）壮苗

 在进行大量增殖阶段后，我们停止固体培养而改为液培，将分化芽转接到1／2ms，3周后，可发现生长健壮、个体粗壮的无根苗。这为以后生根、移苗出瓶，提高适应外界环境，增强抗病能力，提供了良好条件，移栽更易成活。

 （四）根的诱导

 将高约3cm、生长健硕的无根壮苗，接种到培养基（5）上。2周后，苗基部长出辐射状白色小根，每株生根5——7条，3周后，根伸长至1．0——1．5cm，生根率达100％。

 （五）试管苗的移栽

 将培养有试管苗的三角瓶盖打开，在实验室通风处炼苗3d，取出小苗，洗去根部残留培养基，种植前根部在0．2%na2so4溶液中滞留片刻。移栽到用高压灭菌消毒过的蛭石＋细沙＋园土（1：1：1）的混合基质中，地上部喷施0．1％多菌灵溶液，用薄膜覆盖，每天喷水2次，1周后揭膜，成活率在95％以上。