栗属植物ｃｐＳＳＲ标记技术的建立与体系优化

栗属植物ｃｐＳＳＲ标记技术的建立与体系优化

摘　要：叶绿体微卫星标记是一种新的分子标记技术。用1对来源于拟南芥的cpSSR引物研究栗属资源，对栗属植物cpSSR反应体系的主要影响因子进行了优化筛选。结果表明，20 μL反应体系各组分的最适浓度分别为：2.5mmol／LMg²⁺，0.5 u Taq DNA聚合酶，0.25 mmol／L dNTP，10 mg／L的DNA模板，正向引物和反向引物都为0.1 μmol／L，NTCP40最适退火温度为56 ℃。该体系已成功应用于栗属资源的遗传多样性研究中。

关键字：栗属植物；cpSSR；体系优化

中图分类号：S664．2 文献标识码：A　文章编号：1009-9980(2007)04-557-04

现代分子生物学技术的迅速发展，为在DNA水平上研究板栗种质遗传多样性提供了有效的技术手段，同时为栗属植物起源和分类研究提供了新的思路。cpSSR(Chloroplast simple Sequence Repeat，叶绿体简单序列重复)标记技术，是在SSR标记技术基础上发展起来的新的DNA分子标记技术。它具有SSR标记的优点又兼顾到叶绿体基因组的特点，被广泛应用于植物群体遗传分析及系统发育分析的研究中。但由于其引物来源受限，高等木本被子植物中的应用仅在猕猴桃阁、柑橘类和欧洲栗等果树中有报道。未见有cpSSR标记用于其它栗属资源的研究报道。本实验对各个因子的最佳反应条件进行了摸索，建立了适合于板栗等栗属植物的cpSSR反应体系。

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