丁香属植物组织培养的研究

     1 丁香属植物的繁殖研究

本属植物的繁殖方法很多，有播种、扦插、嫁接、分株、压条等，由于其重要的观赏性，其组织培养技术作为当今大量扩繁的一种生物技术手段已经广泛应用于繁殖、保存和培育丁香新品种。有人对欧丁香（S.vulgaris）进行过组培研究，并在茎尖培养中获得成功；李容群等人研究了丁香杂交的组织培养；刘建斌等对紫丁香的组织培养进行了研究，筛选出了腋芽萌生、继代培养和生根培养阶段的适宜培养基。小叶丁香的繁殖方法包括播种、扦插、嫁接、分株、压条等，已在生产实践中得到广泛应用。

2 丁香属植物的器官培养

器官发生途径包括直接器官发生和间接器官发生两种， 一般要经过不定芽的增殖、伸长和生根三步。丁香的器官培养包括离体的茎尖、茎段、叶片、根、种子等器官的无菌培养，以器官作为外植体进行离体培养是丁香组织培养中的主要方面。

直接器官发生是指不经过愈伤组织阶段， 直接从外植体上诱导产生不定芽或不定根的过程，通过这种方式再生的植株，其遗传稳定性较好，但是有关丁香直接器官发生的报道甚少。间接器官发生是先从外植体上诱导出愈伤组织，然后再诱导不定芽或不定根的过程。外植体的不同部位诱导所产生的愈伤组织在不同条件下进行培养形成的不同细胞系也有所不同。小叶丁香（Syringa pubescens Turcz.），将消毒灭菌处理后的外植体放入附加植物生长调节剂（PGR），并经过灭菌的培养基表面，置于培养箱中进行愈伤组织诱导，在添加有1.0 mg.L-1 KT和1.0 mg.L-1 NAA的LS培养基上，嫩叶有浅绿色愈伤组织，呈块状，较松散，触之易碎；而用幼茎诱导产生的愈伤组织则相对较硬并有较深的绿色，含水量较低。 2.1 茎尖的组织培养

腋芽生枝途径是指利用茎尖、腋芽或其分生组织培养而直接获得1 株或1 丛试管苗的增殖方法。丁香茎尖组织培养是建立组织培养程序中一种简单易行的方法，有关研究以紫丁香的根颈部萌生枝条为材料，取其茎尖接种到4种不同的培养基中（MS+6-BA 1.0mg.L-1、MS+6-BA 1.0mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1、MS+6-BA 0.5mg.L-1+IAA 0.2mg.L-1、MS+6-BA 2.5mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1），14d后，茎尖的基部截断处生出许多愈伤组织。腋芽增殖效率比较低，但是得到的植株却有两个优点，即遗传性状比较稳定、自发变异频率很低，且再生所需要的时间短、植株健壮、适应性强、移栽成活率高。

2.2 茎段的离体培养

紫丁香（Syringa oblata）根颈部萌生枝，除去其顶端幼嫩部分和下部木质化较强的部分，只保留靠近顶端的茎段，接种到培养基MS+6-BA0.5mg.L-1+IAA0.2mg.L-1中，腋芽增殖数和试管苗长势均较佳。小叶丁香（Syringa microphylla Diels）又名四季丁香，以当年萌蘖条上部幼嫩的茎段为外植体，诱导培养基为WPM+6-BA1.0mg.L-1 （单位下同）+IBA0.1，平均每个茎段长出 10～15 个芽，出芽率在 90%以上。增殖培养基用MS+6-BA1.0+IAA0.1，壮苗培养基为MS+6-BA1.0+IAA0.2，生根培养基则用1/2MS+NAA0.1，30d时，生根率达 100%。

2.3 胚的离体培养

丁香幼胚培养的最佳胚龄为50～60d，培养的最适培养基为Monnier，其次为MS和L，在培养时必须严格把握好培养时期，以求最高的萌发低浓度的细胞分裂素，提高幼胚的萌发率和成苗率，浓度以BA 0.01 mg·L-1为好，生长素以NAA 0.01 mg·L-1为佳；对暴马丁香（Syringa reticulatavar.mandshurica）的无性繁殖研究以暴马丁香的下胚轴作为外植体，芽诱导培养基为MS+6-BA 5mg.L-1（单位下同）+IBA 0.05-0.5，每个外植体上即形成5～6株无菌小苗；增殖培养基为MS+6-BA 5+IBA 0.1，继代3次后，增殖能力并没有下降；生根培养基为1/2MS+IBA 1，生根率达100%。

3 悬浮细胞培养

在植物组织培养研究中，发现培养细胞中含有各种特殊的代谢产物，如药用成分、饮料、色素、香精等，其中有些是微生物或人工不能合成的，因此，可用大规模细胞培养来生产这些有用产物，使大田农业生产走向工厂化生产。选择小叶丁香（Syringa pubescens Turcz.）的叶、茎、芽为外植体，在MS和LS等培养基上进行愈伤组织诱导与培养，并在继代3次以后转入悬浮细胞培养，测定悬浮培养的细胞生长周期，首次建立了小叶丁香的悬浮细胞培养体系。

丁香的景观价值和经济价值日益受到人们的重视，建立有效的丁香离体培养系统不仅对该优良品系无性繁殖有意义，而且也是对其进行遗传改良和细胞生物学研究的基础。丁香的组织培养在以下几个方面值得深入研究：研究体细胞胚的诱导及人工种子的制作；探索原生质体培养与杂交技术；利用组织培养与诱变处理筛选各种不同抗性材料；研究高频遗传转化技术。

我们应重视丁香组织培养的基础研究，不断完善丁香组织的培养技术，充分发挥其在生理、遗传、细胞等研究中的基础作用。

参考文献

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[3]李容辉，臧淑英，张治明.丁香杂交胚离体培养研究[J].园艺学报，1992，19（2）：187-188

[4]刘华英，沈海龙.暴马丁香下胚轴的离体培养和植株再生[J].植物生理学通讯，2003，39（4）：351

[5]刘建斌，赵祥云，王俊娟，李月华，邵文风.紫丁香的组织培养[J].北京农学院学报，2001，14（4）：42-45.

[6]吴鸣建.小叶丁香的悬浮细胞培养研究[J].郑州大学学报（工学版），2004，25（3）：22-25.

[7]谭文澄，戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京：中国林业出版社，1991.

作者简介：

焦艳红，1978年2月出生，本科学历，研究方向林业科技，林业技术等