植物内生放线菌Ｓｔ２４发酵液杀虫活性的研究

植物内生放线菌Ｓｔ２４发酵液杀虫活性的研究

摘要 从番茄植株根茎接合部分离得到1株有杀虫活性的植物内生放线菌St24，其发酵液对小菜蛾幼虫具有较强的拒食作用，选择性拒食率和非选择性拒食率分别为100%和97.86%。并对朱砂叶螨有一定的触杀作用和产卵忌避作用，发酵液处理24h后成螨死亡率达55.9%，产卵忌避率为74.19%。

关键词 植物内生放线菌St24；发酵液；杀虫活性

中图分类号 S482.3+8文献标识码A文章编号1007-5739（2008）14-0106-01

从放线菌筛选生物活性物质一直是微生物药物研究的热点，目前大约有2/3的天然抗生素是来自放线菌[1]。应用抗生素防治作物病害已有70多年历史，但杀虫抗生素长时期来却无突破性成果，只是在近20年中，杀虫抗生素有了较大发展[2]。本实验室从番茄植株根茎接合部分离得到植物内生放线菌St24，其发酵液不仅对多种病原菌有抑制作用，还具有杀虫活性。本文研究了St24菌株发酵液对小菜蛾幼虫和朱砂叶螨的杀虫作用，为进一步开发应用该菌株奠定了理论基础。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌种。内生放线菌St24，从山西省运城地区番茄植株根茎接合部分离并纯化所得。

1.1.2培养基。高氏一号培养基；种子培养液（葡萄糖5g，可溶性淀粉24g，酵母膏5g，蛋白胨5g，牛肉膏3g，玉米面4g，CoCl2 0.002g，CaCO3 3g，H2O 1 000mL）；发酵培养液（玉米面30g，淀粉10g，葡萄糖20g，大豆粉20g，酵母粉1g，NaCl 2g，MgSO4 0.3g，（NH4）2SO4 2g，CaCO3 6g，KH2PO4 0.2g，H2O 1 000mL）。

1.2St24杀虫活性的测定

1.2.1发酵液的制备。将培养于高氏一号培养基的St24菌株打成直径为4mm的菌块，每瓶2块接种于种子培养液（50mL/250mL）中，28℃ 160rpm培养4d，即为种子液。再取10mL种子液倒入发酵培养液（50mL/250mL）中，28℃ 160rpm进行发酵培养6d。培养完成后发酵培养液经过2次过滤（双层灭菌滤纸和孔径为0.22μm滤膜），即为发酵液。

1.2.2杀虫生物测定方法。小菜蛾幼虫拒食作用采用浸渍叶碟饲喂法测定[3，4]。分别测定不同稀释倍数发酵液48h内对小菜蛾幼虫的选择性拒食作用和非选择性拒食作用，计算拒食率，并用Duncan氏方法比较各处理间的差异。

朱砂叶螨触杀作用采用玻片浸渍法[5]。测定不同稀释倍数发酵液对朱砂叶螨雌成螨的触杀作用，计算校正死亡率。

朱砂叶螨产卵忌避作用：取平整干净的新鲜菜豆叶片，叶柄用湿棉球包裹，放在保湿培养皿中，叶子一半浸渍发酵液，另一半浸渍未接菌的发酵培养液，待叶片自然风干后，每片接雌成螨10头，重复3次，在25℃下放置24h，除去雌成螨后记录各处理的螨卵数，计算产卵忌避率。

2结果

2.1小菜蛾幼虫拒食作用的结果

从表1可以看出，不同稀释倍数的St24发酵液对小菜蛾幼虫均具有较强的拒食活性。2种拒食作用都表现出相同的规律，随着用药间隔时间和稀释倍数的增大，拒食率逐渐减小。选择性拒食作用以发酵原液的拒食活性为最高，处理24h后，拒食率达到了100%，处理48h后，原液的拒食率降低到86.83%，稀释50倍的发酵液拒食率从24h的49.9%下降到20.59%。发酵原液处理24h后对小菜蛾幼虫的非选择性拒食率为97.86%，48h后仍然高达96.41%。

2.2对朱砂叶螨的触杀作用和产卵忌避作用的结果

不同稀释倍数的发酵液对朱砂叶螨的触杀作用测定结果见表2。可以看出，发酵原液的校正死亡率最高，为55.90%，随着稀释倍数的增加，死亡率也逐渐降低，稀释到50倍时校正死亡率仅为12.63%。不同稀释倍数的发酵液对朱砂叶螨都具有产卵忌避活性，其原液的产卵忌避率最高，为74.19%，而稀释50倍时平均忌避率降到10.59%。

3讨论

近些年来，农药在农业生产中的作用越来越受到人们的重视，不仅其杀虫活性要高，对人畜毒性低，还要对天敌安全与环境的相容性好。目前，我国在农业生产中放线菌的应

用较多，放线菌产生的抗生素对小菜蛾[6]、螨类[7]具有毒杀作用已有文献报道，它们对昆虫等表现为毒杀、行为干扰和生殖发育调节作用，以其优良的环保特性正在逐渐成为当今世界农药发展的热点。

本研究结果表明，植物内生放线菌St24的发酵液对小菜蛾幼虫有较强的拒食作用，对朱砂叶螨有触杀作用和产卵忌避作用。由此可知，作为1株能产生杀虫物质的内生放线菌，St24菌株具有巨大的开发应用价值。本试验只是其杀虫活性的初步试验结果，对其发酵液中有效成分的分离纯化，尚待进一步研究。

4参考文献

[1] BULL A T. Biodiversity as a source of innovation in biotechnology[J].Annu Rev Microbiol，1992（46）：219-252.

[2] 陆自强，汪世新，黄奔立.杀虫抗生素的发展概况与展望[J].现代农药，2002（1）：28-32.

[3] 罗世琼，李明，熊继文.天葵石油醚油状粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性研究[J].贵州师范大学学报（自然科学版），2007，25（1）：9-11，22.

[4] 慕立义.植物化学保护研究方法[M].北京：中国农业出社，1991.

[5] FAO. Plant production and protection 21. Recommended methods for measurement of resistance to pesticides[R]. FAO，1980，49-54.

[6] 林壁润，胡珍娣，徐汉虹，等.抑菌霉素A17对12种病原真菌及3种害虫的生物活性[J].中国生物防治，2006，22（3）：198-201.

[7] 欧阳谅，万淑婉，涂国全，等.一株产生杀虫抗生素的链霉菌新种[J].微生物学报，1984，24（3）：195-199.

注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”

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