胚轴接种

  （一）实践目的
    在上次实践基础上进一步学习愈伤组织培养的胚轴切割转接技术，加深对愈伤组织的理解。

    （二）实践地点和时间
    植物组培室、建议4学时
    （三）实践用具与材料
    超净工作台、手术剪、枪状镊、解剖刀或刀片、酒精灯、酒精瓶、纱布、高压灭菌锅、电子天平、盛物篮、记号笔。无菌播种已萌发青豆、无菌播种已萌发豌豆、大量元素、微量元素、维生素、铁盐、BA、2,4—D等母液。
    （四）实践步骤
    1、制备培养基
  为试验观察生长物质对愈伤组织的影响，加深理解，可做对比试验，制备三种培养基
    配方1MS+0.1ml/LBA+0.5ml/L2.4—D
    配方2MS+0.5ml/LBA+0.1ml/L2.4—D
    配方3MS
  2、下胚轴的切割转接
    （1）进行超净工作台开启紫外灯、风机，换鞋、穿工作服、清洁双手等常规操作。检查酒精灯、酒精瓶是否该加酒精。
  （2）将上周无菌播种成活，已经萌芽的种子放入超净工作台，仔细观察种子，把污染的淘汰掉。
    （3）灼烧镊子和解剖刀刀片，冷却，注意不能伤手。
    （4）用工具将萌发种子放入培养皿内滤纸上，看清楚的胚轴位置，用镊子和解剖刀刀片等器械除去子叶和胚根，切割胚轴成5mm左右切段。
    （5）将切割下来的胚轴移入新培养基内，做好标记，三种配方分别移入标记，放入培养室培养。
    3、清洁整理
    按常规清洁整理超净工作台和实验室，注意超净工作台不能用酒精擦拭，地面可用洗衣粉拖地，接种室可进行甲醛加高锰酸钾熏蒸，为以后的实验作准备。
    （五）实训作业
    写出本次实践报告，并写出自己的实践效果和体会
    （六）评分标准
    胚轴识别清楚，胚轴切割转接操作正确，愈伤组织分化成活高，污染小。