蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖

蝴蝶兰属热带气生兰，花形似蝴蝶，因而得名。其花形态美丽，色彩丰富，花期长，在热带兰中有“兰花皇后”之美称，是近年来最受欢迎的洋兰之一。蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株极少发育侧芽，且种子极难萌发,对其进行常规性的繁殖，增殖速度很慢，因此，多采用组织培养的方法对其进行快速繁殖，以达到工厂化育苗的目的。

1 #植物材料 蝴蝶兰Lm品种的幼叶。

2 #培养条件 诱导培养基：MS+BA3.0+NAA0.2。继代培养基:MS+BA2.0+NAA0.5。在上述培养基中均加入蔗糖20g/L（克/升），琼脂12g/L（克/升），椰汁200mL/L（毫升/升）。育苗培养基:1/2MS+IBA1.5+NAA0.05，并加入蔗糖20g/L（克/升），琼脂12g/L（克/升），活性炭5g/L（克/升），椰汁200mL/L（毫升/升）。培养温度25℃-28℃，每日光照10h-12h（小时），光照强度1600lx-2000lx（勒克斯）。

3 #培养方法与生长分化情况

3.1 #外植体接种 从蝴蝶兰植株上取下幼叶（以3-4月龄的植株最好），放在自来水下冲洗干净，然后放入烧杯内待用。在超净工作台上，将烧杯内的叶片用75%酒精消毒30s（秒），然后用无菌水清洗2-3遍，再用0.1%升汞溶液浸泡11min（分钟），最后用无菌水冲洗4-5遍。用无菌手术刀将叶片切成5mmx5mm见方的小块，平放或按极性接种在诱导培养基上，近轴面向上，每瓶不宜接种太多。

3.2 #原球茎的诱导与增殖 幼叶切块在诱导培养基上培养1-2月后，从每个叶片组织块上产生1-7个不等的原球茎，此时，在无菌条件下,将原球茎取出切割成几小块，转入继代培养基中，进行增殖培养。培养一段时间（60天左右）后，再进行分割转移，通过这种方式，原球茎可成倍增长。

3.3 #小植株的培养 将不需继代的原球茎转移到育苗培养基上分化出芽，并逐渐发育成丛生小植株。在无菌条件下，切开丛生小植株，将小植株转入育苗培养基上培养。不久，小植株生根，当小植株长到一定大小时，移入温室。切离丛生小植株时，基部未分化的原球茎及刚分化的小芽应接入诱导培养基中，作为种苗。一段时间后，将长大的种苗移出，种植，小苗及原球茎可继续增殖与分化。

3.4 #移栽及管理 当小植株长至4cm左右，叶3-4片，根2-3条时，即可移栽。将小植株带瓶移入温室2周左右，然后打开瓶塞炼苗3-5d（天），取出苗后，用水冲洗掉植株根部的培养基，将根部放于70%甲基托布津溶液中消毒4h（小时），药液浓度为1500倍。将苗吸干水分后阴晾1h（小时），然后定植于水苔育苗盘中。刚定植的植株应遮光50%左右 ，温度控制在18℃-28℃，湿度以80%-90%为宜，以后逐渐保持在70%左右。缓苗后（两周左右）逐步提高光照强度至6000lx-8000lx（勒克斯）。蝴蝶兰根部忌积水 ，喜通风和干燥，水分过多，易引起根系腐烂。刚出瓶的小苗应勤补水，中苗或大苗根据干湿程度浇水，一般7d(天)-10d（天）左右，基质变干，盆面发白时，宜浇水，浇水时要让整个植料湿透。

4 #小结 在蝴蝶兰的组织培养过程中，叶龄与成功率密切相关，取叶的实生苗年龄以3-4月为最好，其诱导率及每个外植体上的原球茎个数最高。叶切段大小与诱导率直接相关，切段太小，存活率低，以0.5cm左右为最好。此外，出苗时间应掌握在春季为好，且在移栽初期的适时遮阴极其重要，培养条件温度不宜超过28℃。